steroid

ASAL USUL STEROID  
Percobaan-percobaan biogenetik menunjukkan bahwa steroid yang terdapat dialam berasal dari triterpenoid. Steroid yang terdapat dalam jaringan hewan beasal dari triterpenoid lanosterol sedangkan yang terdapat dalam jaringan tumbuhan berasal dari triterpenoid sikloartenol setelah triterpenoid ini mengalami serentetan perubahan tertentu. tahap- tahap awal dari biosintesa steroid adalah sama bagi semua steroid alam yaitu pengubahan asam asetat melalui asam mevalonat dan skualen (suatu triterpenoid) menjadi lanosterol dan sikloartenol. Percobaan-percobaan menunjukkan bahwa skualen terbentuk dari dua molekul farnesil pirofosfat yang bergabung secara ekor-ekor yang segera diubah menjadi 2,3-epoksiskualen. selanjutnya lanosterol terbentuk oleh kecenderungan 2,3-epoksiskualen yang mengandung lima ikatan rangkap untuk melakukan siklisasi ganda. Siklisasi ini diawali oleh protonasi guigus epoksi dan diikuti oleh pembukaan lingkar epoksida. Kolesterol terbentuk dari lanosterol setelah terjadi penyingkiran tiga gugus metil dari molekul lanosterol yakni dua dari atom karbon C-4 dan satu dari C-14. Penyingkiran ketiga gugus metil ini berlangsung secara bertahap, mulai dari gugus metil pada C-14 dan selanjutnya dari C-4. Kedua gugus metil pada kedua C-4 disingkirkan sebagai karbon dioksida, setelah keduanya mengalami oksidasi menjadi gugus karboksilat. sedangkan gugus metil pada C-14 disingkirkan sebagai asam format setelah gugus metil itu mengalami oksidasi menjadi gugus aldehid

Reaksi Pengenalan Steroid 

identifikasi Steroid : Menyiapkan 1 gram simplisia. Kemudiaan dimasukkan ke dalam 100 ml air panas. Didih selama 5 menit.

Kemudian disaring dan difiltrat digunakan sebagai larutan uji untuk identifikasi senyawa steroid. Adanya Steroid pada pengujian ini ditandai terjadinya perubahan warna menjadi warna hijau pada larutan, steroid merupakan golongan lipid yang diturunkan dari senyawa jenuh yang dinamakan siklopentanaperhidrofenantrena, yang memiliki inti dengan 4 cincin. Beberapa turunan steroid yang penting adalah alkohol steroid/sterol. Steroid lain diantaranya asam-asam empedu yang membantu pencernaan lemak dalam usus, hormon seks (androgen dan estrogen) dan hormon kortikosteroid yang dihasilkan oleh korteks adrenal. Vitamin D juga memiliki dasar struktur steroid (Dintith,2000). Steroid tidak terdapat bebas tetapi sebagai turunan senyawa yang lebih rumit seperti glikosida atau ester dengan asam lemak/asam aromatik. Steroid hewan yang khas berupa kolesterol terdapat pada lipid permukaan dan organel tumbuhan, tetapi sering kali tidak ditemukan karena hanya ini terdapat sebagai ester dan glikosida yang tidak larut dalam pelarut yang biasa dipakai untuk sterol bebas (Robinson, 1995). Resin parenkim dalam kayu lunak dan kayu keras mengandung triterpenoid dan steroid terutama terdapat sebagai ester-ester asam lemak. Steroid dan terpenoid berkaitan secara struktural, tetapi beberapa jalur khusus dalam biosintesisnya telah menghasilkan karakteristik-karakteristik struktur tertentu dan fungsi-fungsi biologi (Sjostrom, 1995).

Struktur molekul

Steroid mempunyai struktur dasar yang terdiri dari 17 atom karbon yang membentuk tiga cincin sikloheksana dan satu cincin siklopentana. Perbedaan  jenis steroid yang satu dengan steroid yang lain terletak pada gugus fungsional yang diikat oleh ke-empat cincin ini dan tahap oksidasi tiap-tiap cincin

 

 

 

Kolestrol merupakan steroid yang terbanyak di dalam tubuh manusia. Kolestrol memiliki struktur dasar inti steroid yang mengandung gugus metil, gugus hidroksi yang terikat pada cincin pertama, dan rantai alkil. Kandungan kolestrol dalam darah berkisar 200-220 mg/dL, meningkatnya kadar kolestrol dalam darah dapat menyempitkan pembuluh darah di jantung, sehingga terjadi gangguan jantung koroner. Pengobatan yang sering dilakukan adalah melebarkan pembuluh darah seperti, memasang ring atau melakukan operasi. Kolestrol dalam tubuh dibentuk di dalam liver dari makanan. Struktur kolestrol dapat dilihat pada Gambar.

 

BIOSINTESIS SENYAWA STEROID

Sintesis dalam tubuh dimulai dengan satu molekul asetil KoA dan satu molekul acetoacetyl-CoA , yang terhidrasi membentuk 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA ( HMG-CoA ). Molekul ini kemudian dikurangi menjadi mevalonate oleh enzim HMG-CoA reduktase . Langkah ini adalah, diatur tingkat-membatasi dan langkah ireversibel dalam sintesis kolesterol dan merupakan tempat aksi untuk statin obat (HMG-CoA reduktase inhibitor kompetitif).

Mevalonate kemudian diubah menjadi 3-isopentenil pirofosfat dalam tiga reaksi yang memerlukan ATP . Mevalonate ini dekarboksilasi untuk pirofosfat isopentenil , yang merupakan kunci untuk metabolit reaksi biologis berbagai. Tiga molekul mengembun pirofosfat isopentenil untuk membentuk pirofosfat farnesyl melalui aksi geranyl transferase. Dua molekul pirofosfat farnesyl kemudian  mengembun untuk membentuk squalene oleh aksi sintase squalene dalam retikulum endoplasma . Oxidosqualene adenilat kemudian cyclizes squalene untuk membentuk lanosterol . Akhirnya, lanosterol kemudian dikonversi menjadi kolesterol melalui proses yang kompleks 19 langkah

 

Isolasi dan Pemurnian serta Penentuan Struktur

 

Dalam isolasi steroid disini saya mencontohkan dalam sebuah penelitian dari jurnal yaitu Isolasi dan Pemurnian serta Penentuan Struktur Isolasi dan Pemurnian serta Penentuan Struktur          

Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah labu semprot, wadah maserasi, rangkaian alat destilasi, pinset, botol fial, gelas kimia, gelas ukur, tabung reaksi, batang pengaduk, pipet tetes, labu erlenmeyer, statif, klem, rotary evaporator, alat penentu titik leleh elektroterma, penangas air, oven, neraca analitik, kromatografi kolom flash, kromatografi kolom cair vakum, chamber, lampu UV 254-366 nm dan spektrofotometer IR.

Bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain: umbi lobak (Raphanus sativus Lamk), n-heksana, etilasetat, kloroform, metanol, pereaksi Lieberman-Burchard, pereaksi Dragendorff, asam sulfat pekat, NaOH 10%, pereaksi Mayer, pereaksi FeCl_3, plat KLT G 60 F_254, silika gel 7730, silika gel 7733, silika gel 7734, aquadest dan tissue.

Prosedur Kerja

Ekstraksi

Serbuk kering umbi lobak (Raphanus sativus Lamk). Sebanyak 1 kg dimaserasi dengan pelarut n-heksan sampai seluruh sampel terendam. Setiap 24 jam pelarutnya diganti selama tiga kali (Kholifah, 2009). Ekstrak n-heksana disaring dan dievaporasi sehingga diperoleh ekstrak kental n-heksana.

 

Fraksinasi

Ekstrak kental yang diperoleh di KLT kemudian diteruskan dengan kromatografi kolom cair vakum (KKCV). Fraksi yang diperoleh pada proses (KKCV) di KLT, sehingga R_f yang sama digabung. Fraksi yang sudah digabung dilanjutkan pada kromatografi flash, sehingga diperoleh fraksi yang lebih sederhana (Mahmia, 2006).

Pemurnian

Pemurnian dilakukan dengan cara kristalisasi dan rekristalisasi dengan pelarut yang cocok, hingga diperoleh kristal murni yang ditandai dengan hasil KLT yang menunjukkan satu noda dan pengujian titik leleh.

Identifikasi

Identifikasi senyawa dilakukan dengan menggunakan beberapa pereaksi yaitu, Identifikasi Flavonoid (uji dengan NaOH 10%, uji dengan H₂SO₄ (pekat), dan uji dengan FeCl₃), identifikasi alkaloid (uji dengan pereaksi Dragendorf dan uji dengan pereaksi Mayer)dan identifikasi steroid (uji dengan pereaksi Lieberman-Bourchard).

Analisis IR

Penentuan struktur dilakukan antara lain Inframerah (IR) untuk mengetahui gugus fungsi yang terdapat dalam senyawa organik (Silverstein, 1991).

PERMASALAHAN

1. Bagaimanakah fungsi steroid dalam tubuh manusia?

2. Organ yang terlibat dalam produksi, metabolisme dan ekskresi hormon steroid